Диагностическая значимость натуральных киллеров периферической крови при привычном невынашивании беременности

Цель исследования: изучение содержания натуральных киллеров периферической крови (pNK) и определение их диагностической ценности у женщин с привычным невынашиванием беременности.
Материалы и методы. Обследовано 102 женщины: 28 небеременных (непосредственно после прерывания беременности, группа IA) и 34 беременных, имевших в анамнезе привычное невынашивание беременности (группа IB); группы контроля и сравнения представлены здоровыми женщинами, не имевшими в анамнезе невынашивание беременности: 20 небеременных (группа НА) и 20 беременных (группа НВ). Всем женщинам кроме общеклинического обследования в периферической крови определено содержание токсического фенотипа pNK клеток CD16bright(+)CD56dim(-) методом флуоресцентной микроскопии, интерлейкинов IL-2, IL-6, IL-10, фактора некроза опухоли (TNF-α), сосудистого эндотелиального фактора роста (VEGF) и интерферона гамма (IFN-γ) методом иммуноферментного анализа.
Результаты. Выявлена высокая активность цитотоксического фенотипа NK клеток (CD16+CD56-) в обеих основных группах: в группе IA - 36,5 % по сравнению с группой контроля IIA- 27,5 % (р < 0,05); в группе IB - 37,0 %, в группе сравнения IIB - 27,4 % (р < 0,01). Этот факт подтвердился динамикой других иммунологических параметров, индуцируемых NK клетками. Так, у небеременных и беременных с привычным невынашиванием беременности в анамнезе установлено достоверное повышение содержания IL-6: в группе IA - до 28,5 пг/мл по сравнению с контрольной группой IIA, где его содержание составило 14,0 пг/мл; в группе IB - до 16,7 пг/мл, в группе сравнения IIB - 12,2 пг/мл (р < 0,01). Содержание интерлейкинов IL-2 и IL-10 значимо не различалось во всех исследованных группах. Содержание TNF-a было повышено в обеих группах: в группе IA - 39,0 пг/мл, в контрольной группе IIA - 27,5 пг/мл (р < 0,05); в группе IB - 35,1 пг/мл, в группе сравнения IIB - 23,4 пг/мл (р < 0,01). Содержание VEGF у обследованных в возрасте 21-30 лет было повышено: до 548,5 пг/мл у небеременных (группа IA), в контрольной группе IIA - до 310,8 пг/мл (р < 0,01); у беременных (группа IB) - до 476,1 пг/мл, в группе сравнения IIB - до 381,5 пг/мл (различия несущественны, англ. non significant, NS). Для пациенток в возрасте 32-40 лет различия в содержании VEGF были несущественны (NS). Концентрация IFN-y была увеличена в группе IA до 9,2 пг/мл, в контрольной группе IIA - до 8,64 пг/мл, в группе IB - до 8,36 пг/мл, в группе сравнения - до 7,56 пг/мл, т. е. различия в содержании IFN-γ во всех группах были несущественны (NS).
Заключение. Повышение в крови женщин с привычным невынашиванием беременности в анамнезе содержания натуральных киллеров с цитотоксическим фенотипом CD16+CD56- приводит к дисбалансу иммунологических параметров и находится в прямой корреляции с повышением активности интерлейкинов IL-2, IL-6 и TNF-α, что вызывает нарушение иммунологической толерантности по отношению к плоду и может явиться причиной прерывания беременности на ранних этапах. Это дает возможность использовать полученные параметры в качестве диагностического и прогностического критерия при привычном невынашивании беременности.

1. Сидельникова В.М., Сухих Г.Т. Невынашивание беременности. М.: МИА, 2010. 534 с.

2. Radovic Janoevic D., Popovic J., Kkrstic M. et al. The structure of immunocompetent decidual cells in recurrent missed abortions. Vojnosanit Pregl. 2016;73(4):306-11. https://doi.org/10.2298/VSP141226018R.

3. Sharma S. Natural killer cells and regulatory T cells in early pregnancy loss. Int J Der Biol. 2014;58:219-29. https://doi.org/10.1387/ijdb.140109ss.

4. Kuon R.J., Vomstein K., Weber M et al. The “killer cell story” in recurrent miscarriage: association between activated peripheral lymphocytes and uterine natural killer cells. J Reprod Immunol. 2017;119:9-14. https://doi.org/10.1016/j.jri.2016.11.002.

5. Fukuli A., Finamizu A., Fikuhara R., Shibahara H. Expression of natural cytotoxicity receptors and cytokine production on endometrial natural killer cells in women with recurrent pregnancy loss or implantation failure and the expression of natural cytotoxicity receptors on peripheral blood natural killer in pregnant women with history of recurrent pregnancy loss. J Obstret Gynaecol Res. 2017;43(11):1678-86. https://doi.org/10.1111/jog13448.

6. Carayannopolos L., Barks J.L., Yokoyama W.M., Riley J.K. Murine trophoblast cells induce NK cell interferon-gamma production through KLRK1. Biol Reprod. 2010;83(3):404-14. https://doi.org/10.1095/biolreprod.110.084509.

7. Ratsep M.T., Felker A.M., Kay V.R. et al. Uterine natural killer cells; supervisors of vasculature construction in early delidua basalis. Reproduction. 2015;149(2):R91-102. https://doi.org/10.1530/REP-14-0271.

8. Абакушина Е.В., Кузьмина Е.Г., Коваленко Е.И. Основные свойства и функции NK-клеток человека. Иммунология. 2012;33(4):220-4.

9. Prado-Draver A., Teppa J., Sonshez P., Cameio M.I. Immunophenotype of peripheral T lymphocytes, NK cells and expression of CD69 activation marker in patients with recurrent spontaneous abortions, during the mid-luteal phase. Am J Reprod Immunol. 2008;60(1):66-74. https://doi.org/10.1111/j.1600-0897.2008.00591.x.

10. Ebina Y., Nishino Y., Deguchi M. et al. Natural killer cell activity in women with recurrent miscarriage: etiology and pregnancy outcome. J Reprod Immunol. 2017;120:42-77. https://doi.org/10.1016/j.jri.2017.04.005.

11. Seshardi S., Sunkara S.K. Natural killer cells in female infertility and recurrent miscarriage: asystematic review and meta-analysis. Hum Reprod Update. 2014;20(3):429-38. https://doi.org/10.1093/humupd/dmt056.

12. Vargas R.G., Bompeixe E.P., Fransa P.P. et al. Activating killer cell immunoglobulin-like receptor genes association with recurrent miscarriage. Am J Reprod Immunol. 2009;62(1):34-43. https://doi.org/10.1111/j.1600-0897.2009.00709.x.

13. Sacks G., Yang Y, Gowen E. et al. Detailed analysis of peripheral blood natural killer cells in women with repeated IVF failure. Am J Reprod Immunol. 2012;67(5):434-43. https://doi.org/10.1111/j.1600-0897.2009.00709.x.

14. Hadinedoushan H., Mirahmadian M., Aflatonian A. Increased natural killer cell cytotoxicity and IL-2 production in recurrent spontaneous abortion. Am J Reprod Immunol. 2007;58(5):409-14. https://doi.org/10.1111/j.1600-0897.2007.00524.x.

15. Ivanov P., Lukanov T., Konova E. et al. Activation of peripheral natural killer cells in women with repeated early pregnancy loss. Akush Ginekol (Sofia). 2015;54(8):3-7. [Article in Bulgarian].

16. Saito S., Nakashima A., Shima T. Future directions of studies for recurrent miscarriage associated with immunol etiologies. J Reprod Immunol. 2011;90(1):91-5. https://doi.org/10.1016/j.jri.2011.03.003.

17. Yoo J.H., Kwak-Kim J., Han A.R. et al. Peripheral blood NK cell cytotoxicities are negatively correlated with CD8(+) T cells in fertile women, but not in women with a history of recurrent pregnancy loss. Am J Reprod Immunol. 2012;68(1):38-46. https://doi.org/10.1111/j.1600-0897.2012.01133.x.

18. Tang A.W., Alfirevic Z., Quenby S. Natural killer cells and pregnancy outcomes in women with recurrent miscarriage and infertility: a systematic review. Hum Reprod. 2011;26(8):1971-80. https://doi.org/10.1093/humrep/der164.

19. Katano K., Suzuki S., Ozaki Y. et al. Peripheral natural killer cell activity as predictor of recurrent pregnancy loss: a large cohort study. Fertil Steril. 2013;100(6):1629-34. https://doi.org/10.1016/j.fertnstent.2013.07.1996.

20. Ozcimen E.E., Kiyiei H., Ucknyu A., Yanik F.E. Are CD57+ Natural Killer cells really important in early pregnancy failure? Arch Gynecol Obstet. 2009;279(4):493-7. https://doi.org/10.1007/s00404-008-0736-y.

21. Yen C.-C., Horng H.-C., Wang P.-H. Recurrent miscarriage: are NK cell subsets a good predictor ? J Chin Med Assoc. 2019;82:443. https://doi.org/10.1097/JCMA.0000000000000097.

22. Hossein S., Zarnani A.-H., Asgarian-Omran H. et al. Comparative analysis of NK cell subsets in menstrual and peripheral blood of patients with unexplained recurrent spontaneous abortion and fertile subjects. J Reprod Immunol. 2014;103:9-17. https://doi.org/10.1016/j.jri.2014.03.002.

23. Giuliani E., Parkin K.L., Lessey B.A. et al. Characterization of uterine NK cell in women with infertility or recurrent pregnancy loss and associated endometriosis. Am J Reprod Immunol. 2014;72(3):262-9. https://doi.org/1111/aji.12259.

24. Zhao X., Jiang Y., Ping Y. et al. Associations between tumor necrosis factor-а and interleukin-6 polymorphisms and unexplained recurrent spontaneous abortion risk: a meta-analysis. Medicine (Baltimore). 2019;98(46):e17919. https://doi.org/10.1097/MD.0000000000017919.

25. Eskicioglu F., Ozdemir A.T., Ozdemir R.B. et al. The association of HLA-G and immune markers in recurrent miscarriage. J Matern Fetal Neonatal Med. 2016;29(18):3056-60. https://doi.org/10.3109/14767058.2015.1114085.

26. Gao Y., Wang P.L. Increased CD56 (+) cells and enhanced Th1 responses in human unexplained recurrent spontaneous abortion. Genet Mol Res. 2015;14(4):18103-9. https://doi.org/10.4238/2015.December.22.36.

27. Fukui A., Kwak-Kim J., Ntrivallas E. et al. Intracellular cytokine expression of peripheral blood natural killer cell subsets in women with recurrent spontaneous abortions and implantation failures. Fertil Steril. 2008;89(1):157-65. https://doi.org/10.1016/j.fertnstert.2007.02.12.