akusherstvoObstetrics, Gynecology and ReproductionАкушерство, Гинекология и Репродукция2313-73472500-3194IRBIS LLC10.17749/2313-7347.2019.13.4.313-325akusherstvo-600Research ArticleORIGINAL ARTICLEОРИГИНАЛЬНОЕ ИССЛЕДОВАНИЕDo high levels of folic acid in women’s blood impact the outcome of IVF?Влияет ли высокий уровень фолиевой кислоты в крови женщин на эффективность программ ЭКО?https://orcid.org/0000-0001-5345-0230ПолзиковМ. А.PolzikovM. A.

Ползиков Михаил Александрович – к.х.н., генеральный директор

Россия, 117246 Москва, Научный проезд, д. 20, стр. 2.

Scopus Author ID: 10139451800.

Mikhail A. Polzikov – PhD, General Director

20 bild. 2, Nauchnyi proezd, Moscow 117246, Russia.

Scopus Author ID: 10139451800.

mikhail.polzikov@gmail.comhttps://orcid.org/0000-0002-3367-9844БлиновД. В.BlinovD. V.

 Блинов Дмитрий Владиславович – к.м.н., руководитель по медицинским и научным вопросам; преподаватель, кафедра неврологии, психиатрии и наркологии; врач-невролог

Россия, 127006 Москва, ул. Садовая-Триумфальная, д. 4-10.

Россия, 123056 Москва, 2-я Брестская ул., д. 5, стр. 1-1а.

Россия, 143081 Московская область, Лапино, 1-ое Успенское шоссе, д. 111.

Researcher ID: E-8906-2017. RSCI: 9779-8290.

Dmitry V. Blinov – MD, PhD, MBA, Head of Medical and Scientific Affairs; Faculty Member, Department of Neurology, Psychiatry and Narcology; Neurologist, Lapino Clinic Hospital

4-10 Sadovaya-Triumfalnaya St., Moscow 127006, Russia.

5 bild. 1-1a, 2-ya Brestskaya St., Moscow 123056, Russia.

111, 1-e Uspenskoe shosse, Lapino, Moscow region 143081, Russia.

Researcher ID: E-8906-2017. RSCI: 9779-8290.

УшаковаТ. И.UshakovaT. I.

 Ушакова Татьяна Игоревна – к.б.н., биостатистик

Россия, 117246 Москва, Научный проезд, д. 20, стр. 2.

Россия, 127006 Москва, ул. Садовая-Триумфальная, д. 4-10.

Tatyana I. Ushakova – PhD, Biostatistics

20 bild. 2, Nauchnyi proezd, Moscow 117246, Russia.

4-10 Sadovaya-Triumfalnaya St., Moscow 127006, Russia.

БарахоеваЗ. Б.BarakoevaZ. B.

Барахоева Зарема Бекхановна – к.м.н., врач акушер-гинеколог, репродуктолог

Россия, 117186 Москва, ул. Нагорная, д. 4А.

Zarema B. Barakoeva – PhD, Obstetrician-Gynecologist, Reproductologist

4A Nagornaya St., Moscow 117186, Russia.

ВовкЛ. А.VovkL. A.

Вовк Людмила Анатольевна – врач акушер-гинеколог, репродуктолог

Россия, 117209, Москва, Севастопольский проспект, д. 24, корп. 1.

Lyudmila A. Vovk – Obstetrician-Gynecologist, Reproductologist

24 bild. 1, Sevastopolskiy prospekt, Moscow 117209, Russia.

ОвчинниковаМ. М.OvchinnikovaM. M.

Овчинникова Мария Михайловна – врач акушер-гинеколог, репродуктолог

Россия, 143081 Московская область, Лапино, 1-ое Успенское шоссе, д. 111.

Maria M. Ovchinnikova – Obstetrician-Gynecologist, Reproductologist

111, 1-e Uspenskoe shosse, Lapino, Moscow region 143081, Russia.

ФетисоваЮ. А.FetisovaJu. A.

Фетисова Юлия Андреевна – врач акушер-гинеколог, репродуктолог

Россия, 117209, Москва, Севастопольский проспект, д. 24, корп. 1.

Julia A. Fetisova – Obstetrician-Gynecologist, Reproductologist

24 bild. 1, Sevastopolskiy prospekt, Moscow 117209, Russia.

НиколаеваЕ. В.NikolaevaE. V.

Николаева Елена Вячеславовна – зав. клинико-диагностической лабораторией

Россия, 117209, Москва, Севастопольский проспект, д. 24, корп. 1.

Elena V. Nikolaeva – Head of Clinical and Diagnostic Laboratory

24 bild. 1, Sevastopolskiy prospekt, Moscow 117209, Russia.

НиколаевА. А.NikolaevA. A.

Николаев Александр Андреевич – зав. клинико-диагностической лабораторией

Россия, 143081 Московская область, Лапино, 1-ое Успенское шоссе, д. 111.

Alexander A. Nikolaev – Head of Clinical and Diagnostic Laboratory

111, 1-e Uspenskoe shosse, Lapino, Moscow region 143081, Russia.

https://orcid.org/0000-0002-5745-3348СергеевО. В.SergeyevO. V.

Сергеев Олег Владимирович – к.м.н., старший научный сотрудник, руководитель группы эпигенетической эпидемиологии

Россия, 119991 Москва, Ленинские горы, д. 1.

Researcher ID: H-8854-2013. Scopus Author ID: 8708534100.

Oleg V. Sergeyev – MD, PhD, Senior Researcher, Head of Epigenetic Epidemiology Unit

1 Leninskie gory, Moscow 119234, Russia.

Researcher ID: H-8854-2013. Scopus Author ID: 8708534100.

ООО «АйВиФарма»РоссияIVFarma LLCRussian FederationИнститут Превентивной и Социальной Медицины; АНО ДПО «Московский медико-социальный институт имени Ф.П. Гааза»; Клинический госпиталь Лапино, ГК «Мать и Дитя»РоссияInstitute for Preventive and Social Medicine; Moscow Haass Medical – Social Institute; Lapino Clinical Hospital, GC «Mother and Child»Russian FederationООО «АйВиФарма»; Институт Превентивной и Социальной МедициныРоссияIVFarma LLC; Institute for Preventive and Social MedicineRussian FederationКлиника репродукции человека «АльтраВита»Россия«AltraVita» Human Reproduction ClinicRussian FederationПеринатальный медицинский центр, ГК «Мать и Дитя»РоссияPerinatal Medical Center, GC «Mother and Child»Russian FederationКлинический госпиталь Лапино, ГК «Мать и Дитя»РоссияLapino Clinical Hospital, GC «Mother and Child»Russian FederationНаучно-исследовательский институт физико-химической биологии имени А.Н. Белозерского, ФГБОУ ВО «Московский государственный университет имени М.В. Ломоносова»РоссияA.N. Belozersky Research Institute of Physico-Chemical Biology, Lomonosov Moscow State UniversityRussian Federation201916012020134313325Copyright © Polzikov M.A., Blinov D.V., Ushakova T.I., Barakoeva Z.B., Vovk L.A., Ovchinnikova M.M., Fetisova J.A., Nikolaeva E.V., Nikolaev A.A., Sergeyev O.V., 20202020Ползиков М.А., Блинов Д.В., Ушакова Т.И., Барахоева З.Б., Вовк Л.А., Овчинникова М.М., Фетисова Ю.А., Николаева Е.В., Николаев А.А., Сергеев О.В.Polzikov M.A., Blinov D.V., Ushakova T.I., Barakoeva Z.B., Vovk L.A., Ovchinnikova M.M., Fetisova J.A., Nikolaeva E.V., Nikolaev A.A., Sergeyev O.V.Данная работа распространяется под лицензией Creative Commons Attribution 4.0.This work is licensed under a Creative Commons Attribution 4.0 License.https://www.gynecology.su/jour/article/view/600

Of significant scientific and practical interest is the relationship between the blood plasma levels of folic acid at preconception and the outcome of pregnancy. A phase III clinical trial on the efficacy and safety of the biosimilar follitropin alfa has recently been completed within the ongoing assisted reproductive technology (ART) programs. The results confirmed the therapeutic equivalence of the investigational agent to the reference drug. In this trial, women with tubal infertility or male factor infertility were included. The study did not include women with endometriosis and polycystic ovary syndrome. A total of 118 patients were recruited; of those, 110 were randomized; then the 110 women underwent hormonal stimulation and 98 of them underwent embryo transfer. Blood samples were taken within a period not exceeding 28 days before the start of the stimulation; the samples were analyzed for folic acid (FA), trace elements and hormones. The results were grouped by quartiles (Q) according to the levels of FA in the blood serum: Q1 – 2.9–10.7 ng/ml, Q2 – 10.8–20.5 ng/ml, Q3 – 20.6–32.9 ng/ml, and Q4 ≥ 33.0 ng/ml. In addition, group distribution was also made according to the WHO recommendations: possible FA deficiency – 3.0–5.9 ng/ml, normal – 6.0–20.0 ng/ml, and elevated levels – more than 20 ng/ml. A significant decrease in the number of fertilized oocytes, clinical pregnancies and live births in Q4 (increased FA) compared with Q1 was found. Also, in women with high levels of FA, the number of aspirated oocytes was significantly lower than that in women with normal or decreased FA levels. We also found a significant inverse relationship between the number of aspirated oocytes and the levels of estradiol and serum FA. Plasma FA levels > 20 ng/ml detected prior to the IVF procedure may be associated with a low number of aspirated oocytes, and FA levels > 33 ng/ml – with a reduced number of fertilized oocytes, clinical pregnancies and live births. Thus, the excessive content of FA in the body can contribute to a worse outcome of IVF programs.

Большой научный и практический интерес представляет сопоставление уровней фолиевой кислоты в сыворотке крови на этапе прегравидарной подготовки с исходом беременности. Недавно было завершено клиническое исследование III фазы эффективности и безопасности биоаналогового фоллитропина альфа у женщин в программах вспомогательных репродуктивных технологий (ВРТ), которое подтвердило его терапевтическую эквивалентность референтному препарату. Критериями включения были трубное бесплодие и мужской фактор бесплодия. В исследование не включали женщин с эндометриозом и синдромом поликистозных яичников. Всего было набрано 118 пациенток, 110 были рандомизированы, 110 была проведена стимуляция, и 98 пациенткам был сделан перенос эмбриона. В рамках субанализа образцы крови, взятые в период, не превышавший 28 дней до начала стимуляции, анализировали на предмет содержания фолиевой кислоты (ФК), других микроэлементов и гормонов с использованием одних и тех же методик. Женщины распределялись по квартилям (Q) по содержанию ФК в сыворотке крови: Q1 – 2,9–10,7 нг/мл, Q2 – 10,8–20,5 нг/мл, Q3 – 20,6–32,9 нг/мл и Q4 – 33,0 нг/мл и более. Также было предпринято распределение по группам на основании уровней ФК, рекомендован- ных ВОЗ: возможный дефицит – 3,0–5,9 нг/м, норма – 6,0–20,0 нг/мл, повышенный уровень – больше 20 нг/мл. Было продемонстрировано существенное снижение количества оплодотворенных ооцитов, клинических беременностей и родов живым ребенком в Q4 (повышенное содержание ФК) по сравнению c Q1. Также в группе женщин с повышенным содержанием ФК количество аспирированных ооцитов было статистически значимо ниже, чем в группе с нормальным содержанием, а также с возможным дефицитом ФК. В ходе субанализа продемонстрирована значимая обратная связь между количеством аспирированных ооцитов и уровнем эстрадиола, а также содержанием ФК в крови. Уровень ФК > 20 нг/мл в сыворотке крови перед программой экстракорпорального оплодотворения (ЭКО) может быть ассоциирован с пониженным количеством аспирированных ооцитов, а > 33 нг/мл – с пониженным количеством оплодотворенных ооцитов, снижением количества клинических беременностей и родов живым ребенком. Таким образом, чрезмерное содержание ФК в организме может способствовать ухудшению исходов программ ЭКО.

фолиевая кислотафолатыпрегравидарная подготовкабеременностьэкстракорпоральное оплодотворениеЭКОвспомогательные репродуктивные технологииВРТисходыаспирированные ооцитыоплодотворенные ооцитыбиохимическая беременностьклиническая беременностьроды живым ребенкомfolic acidfolatespreconceptionpregnancyin vitro fertilizationIVFassisted reproductive therapyARToutcomesaspirated oocytesfertilized oocytesbiochemical pregnancyclinical pregnancylive birthReferencesMilunsky A., Jick H., Jick S.S. et al. Multivitamin/folic acid supplementation in early pregnancy reduces the prevalence of neural tube defects. JAMA. 1989;262(20):2847–52. DOI: 10.1001/jama.262.20.2847.Milunsky A., Jick H., Jick S.S. et al. Multivitamin/folic acid supplementation in early pregnancy reduces the prevalence of neural tube defects. JAMA. 1989;262(20):2847–52. DOI: 10.1001/jama.262.20.2847.Ray J.G., Meier C., Vermeulen M.J. et al. Association of neural tube defects and folic acid food fortification in Canada. Lancet. 2002;360(9350):2047–8. DOI: 10.1016/S0140-6736(02)11994-5.Ray J.G., Meier C., Vermeulen M.J. et al. Association of neural tube defects and folic acid food fortification in Canada. Lancet. 2002;360(9350):2047–8. DOI: 10.1016/S0140-6736(02)11994-5.Rosenquist T.H., Ratashak S.A., Selhub J. Homocysteine induces congenital defects of the heart and neural tube: effect of folic acid. Proc Natl Acad Sci U S A. 1996;93(26):15227–32. DOI: 10.1073/pnas.93.26.15227.Rosenquist T.H., Ratashak S.A., Selhub J. Homocysteine induces congenital defects of the heart and neural tube: effect of folic acid. Proc Natl Acad Sci U S A. 1996;93(26):15227–32. DOI: 10.1073/pnas.93.26.15227.Блинов Д.В., Зимовина У.В., Джобава Э.М. Ведение беременных с дефицитом магния: фармакоэпидемиологическое исследование. ФАРМАКОЭКОНОМИКА. Современная фармакоэкономика и фармакоэпидемиология. 2014;7(2):23–32.Blinov D.V., Zimovina U.V., Dzhobava E.M. Management of magnesium deficiency in pregnant women: pharmacoepidemiological study. [Vedenie beremennyh s deficitom magniya: farmakoepidemiologicheskoe issledovanie]. FARMAKOEKONOMIKA. Sovremennaya farmakoekonomika i farmakoepidemiologiya. 2014;7(2):23–32. (In Russ.).Malek L., Umberger W., Makrides M., Zhou S.J. Poor adherence to folic acid and iodine supplement recommendations in preconception and pregnancy: a cross‐sectional analysis. Aust N Z J Public Health. 2016;40(5):424–9. DOI: 10.1111/1753-6405.12552.Malek L., Umberger W., Makrides M., Zhou S.J. Poor adherence to folic acid and iodine supplement recommendations in preconception and pregnancy: a cross‐sectional analysis. Aust N Z J Public Health. 2016;40(5):424–9. DOI: 10.1111/1753-6405.12552.Navarrete-Muñoz E.M., Valera-Gran D., García de la Hera M. et al. Use of high doses of folic acid supplements in pregnant women in Spain: an INMA cohort study. BMJ Open. 2015;5(11):e009202. DOI: 10.1136/bmjopen-2015-009202.Navarrete-Muñoz E.M., Valera-Gran D., García de la Hera M. et al. Use of high doses of folic acid supplements in pregnant women in Spain: an INMA cohort study. BMJ Open. 2015;5(11):e009202. DOI: 10.1136/bmjopen-2015-009202.Study to compare efficacy and safety of Primapur and Gonal-f in women for assisted reproductive treatment. Available at: https://clinicaltrials.gov/ct2/show/NCT03088137.Study to compare efficacy and safety of Primapur and Gonal-f in women for assisted reproductive treatment. Available at: https://clinicaltrials.gov/ct2/show/NCT03088137.Подкорытов А.Б., Жиляев О.В., Ползиков М.А. Шприц-ручка для самостоятельного введения раствора фоллитропина альфа с минимальным шагом устанавливаемой дозы 5 МЕ. Акушерство, гинекология и репродукция. 2017;11(4):35–42. DOI: 10.17749/2313-7347.2017.11.4.035-042.Podkorytov A.B., Zhilyaev O.V., Polzikov M.A. A pen injector for selfadministration of follitropin alpha solution with a minimal dose increment of 5 IU. [Shpric-ruchka dlya samostoyatel’nogo vvedeniya rastvora follitropina al’fa s minimal’nym shagom ustanavlivaemoj dozy 5 ME]. Akusherstvo, ginekologiya i reproduktsiya. 2017;11(4):35–42. (In Russ.). DOI: 10.17749/2313-7347.2017.11.4.035-042.Воробьев И.И., Семихин А.С., Головина Е.О. Производство нового биоаналогового фоллитропина альфа в России – это уже реальность в 2017 году. Акушерство, гинекология и репродукция. 2017;11(3):116–26. DOI: 10.17749/2313-7347.2017.11.3.116-126.Vorobiev I.I., Semikhin A.S., Golovina E.O. The novel biosimilar of follitropin alfa to be manufactured in Russia starting from 2017. [Proizvodstvo novogo bioanalogovogo follitropina al’fa v Rossii – eto uzhe real’nost’ v 2017 godu]. Akusherstvo, ginekologiya i reproduktsiya. 2017;11(3):116–26. (In Russ.). DOI: 10.17749/2313-7347.2017.11.3.Барахоева З.Б., Вовк Л.А., Зорина И.В. и др. Основные результаты сравнительного многоцентрового исследования III фазы биоаналогового фоллитропина альфа (Примапур®) и оригинального фоллитропина альфа (Гонал-ф®). Акушерство, гинекология и репродукция. 2018;12(3):5–16. DOI: 10.17749/2313-7347.2018.12.3.005-016.Barakhoeva Z.B., Vovk L.A., Zorina I.V.et al. Major results of a phase III comparative multicenter study on the follitropin alfa biosimilar (Primapur®) and the original follitropin alfa (Gonal-f®). [Osnovnye rezul’taty sravnitel’nogo mnogocentrovogo issledovaniya III fazy bioanalogovogo follitropina al’fa (Primapur®) i original’nogo follitropina al’fa (Gonal-f®)]. Akusherstvo, ginekologiya i reproduktsiya. 2018;12(3):5–16. (In Russ.). DOI: 10.17749/2313-7347.2018.12.3.005-016.Polzikov M., Barakhoeva Z., Yakovenko S. et al. A multicenter, randomized study comparing the efficacy of follitropin alpha biosimilar and the original follitropin alpha. Hum Reprod. 2019;34(Suppl 1):439.Polzikov M., Barakhoeva Z., Yakovenko S. et al. A multicenter, randomized study comparing the efficacy of follitropin alpha biosimilar and the original follitropin alpha. Hum Reprod. 2019;34(Suppl 1):439.Orlova N.A., Kovnir S.V., Khodak Y.A. et al. High-level expression of biologically active human follicle stimulating hormone in the Chinese hamster ovary cell line by a pair of tricistronic and monocistronic vectors. PLoS One. 2019;14(7):e0219434. DOI: 10.1371/journal.pone.0219434.Orlova N.A., Kovnir S.V., Khodak Y.A. et al. High-level expression of biologically active human follicle stimulating hormone in the Chinese hamster ovary cell line by a pair of tricistronic and monocistronic vectors. PLoS One. 2019;14(7):e0219434. DOI: 10.1371/journal.pone.0219434.Barakhoeva Z., Vovk L., Fetisova Yu. et al. A multicenter, randomized, phase III study comparing the efficacy and safety of follitropin alpha biosimilar and the original follitropin alpha. Eur J Obstet Gynecol Reprod Biol. 2019;241:6–12. DOI: 10.1016/j.ejogrb.2019.07.032.Barakhoeva Z., Vovk L., Fetisova Yu. et al. A multicenter, randomized, phase III study comparing the efficacy and safety of follitropin alpha biosimilar and the original follitropin alpha. Eur J Obstet Gynecol Reprod Biol. 2019;241:6–12. DOI: 10.1016/j.ejogrb.2019.07.032.Committee for Medicinal Products for Human Use. Guideline on non-clinical and clinical development of similar biological medicinal products containing recombinant human follicle stimulating hormone (r-hFSH). EMA/597110/2012. London: European Medicines Agency, 2013. 7 p. Available at: https://www.ema.europa.eu/en/documents/scientific-guideline/guideline-non-clinical-clinical-development-similar-biological-medicinal-products-containing_en.pdf.Committee for Medicinal Products for Human Use. Guideline on non-clinical and clinical development of similar biological medicinal products containing recombinant human follicle stimulating hormone (r-hFSH). EMA/597110/2012. London: European Medicines Agency, 2013. 7 p. Available at: https://www.ema.europa.eu/en/documents/scientific-guideline/guideline-non-clinical-clinical-development-similarbiological-medicinal-products-containing_en.pdf.Руководство по экспертизе лекарственных средств. Том IV. М.: Полиграф-Плюс, 2014. 172 с.Guidelines for the examination of medicines. Vol. IV. [Rukovodstvo po ekspertize lekarstvennyh sredstv. Tom IV]. Moskva: Poligraf-Plyus, 2014. 172 s. (In Russ.).Nohr E.A., Olsen J., Bech B.H. et al. Periconceptional intake of vitamins and fetal death: a cohort study on multivitamins and folate. Int J Epidemiol. 2014;43(1):174–84. DOI: 10.1093/ije/dyt214.Nohr E.A., Olsen J., Bech B.H. et al. Periconceptional intake of vitamins and fetal death: a cohort study on multivitamins and folate. Int J Epidemiol. 2014;43(1):174–84. DOI: 10.1093/ije/dyt214.Примапур. Инструкция по медицинскому применению. ЛП-005826. Государственный Реестр Лекарственных Средств. Режим доступа: http://grls.rosminzdrav.ru/Grls_View_v2.aspx?routingGuid=6e4af9adad10-4e7b-b8f0-948e4bb80fbb&t=.Primapur. Instructions for medical use. LP-005826. State Register of Medicinal Products. [Primapur. Instrukciya po medicinskomu primeneniyu. LP-005826. Gosudarstvennyj Reestr Lekarstvennyh Sredstv]. Available at: http://grls.rosminzdrav.ru/Grls_View_v2.aspx?routingGuid=6e4af9ad-ad10-4e7b-b8f0-948e4bb80fbb&t=.WHO. Serum and red blood cell folate concentrations for assessing folate status in populations. Vitamin and Mineral Nutrition Information System. Geneva: World Health Organization, 2015. 7 р. Available at: https://apps.who.int/iris/bitstream/handle/10665/162114/WHO_NMH_NHD_EPG_15.01.pdf?sequence=1.WHO. Serum and red blood cell folate concentrations for assessing folate status in populations. Vitamin and Mineral Nutrition Information System. Geneva: World Health Organization, 2015. 7 р. Available at: https://apps.who.int/iris/bitstream/handle/10665/162114/WHO_NMH_NHD_EPG_15.01.pdf?sequence=1.Twigt J.M., Hammiche F., Sinclair K.D. et al. Preconception folic acid use modulates estradiol and follicular responses to ovarian stimulation. J Clin Endocrinol Metab. 2011;96(2):E322–9. DOI: 10.1210/jc.2010-1282.19. Twigt J.M., Hammiche F., Sinclair K.D. et al. Preconception folic acid use modulates estradiol and follicular responses to ovarian stimulation. J Clin Endocrinol Metab. 2011;96(2):E322–9. DOI: 10.1210/jc.2010-1282.Murto T., Skoog Svanberg A., Yngve A. et al. Folic acid supplementation and IVF pregnancy outcome in women with unexplained infertility. Reprod Biomed Online. 2014;28(6):766–72. DOI: 10.1016/j.rbmo.2014.01.017.Murto T., Skoog Svanberg A., Yngve A. et al. Folic acid supplementation and IVF pregnancy outcome in women with unexplained infertility. Reprod Biomed Online. 2014;28(6):766–72. DOI: 10.1016/j.rbmo.2014.01.017.Centers for Disease Control and Prevention (CDC). Spina bifida and anencephaly before and after folic acid mandate, United States, 1995– 1996 and 1999–2000. MMWR Morb Mortal Wkly Rep. 2004;53(17):362–5.Centers for Disease Control and Prevention (CDC). Spina bifida and anencephaly before and after folic acid mandate, United States, 1995–1996 and 1999–2000. MMWR Morb Mortal Wkly Rep. 2004;53(17):362–5.Human Vitamin and Mineral Requirements. World Health Organization, Food and Agriculture Organization of the United Nations. WHO, 2001. 303 p. Available at: http://www.fao.org/3/a-y2809e.pdf.Human Vitamin and Mineral Requirements. World Health Organization, Food and Agriculture Organization of the United Nations. WHO, 2001. 303 p. Available at: http://www.fao.org/3/a-y2809e.pdf.Food and Nutrition Board. Dietary reference intakes for thiamin, riboflavin, niacin, vitamin B6, folate, vitamin B12, pantothenic acid, biotin, and choline. Washington, DC: National Academies Press, 1998. Available at: https://www.ncbi.nlm.nih.gov/books/NBK114310.Food and Nutrition Board. Dietary reference intakes for thiamin, riboflavin, niacin, vitamin B6, folate, vitamin B12, pantothenic acid, biotin, and choline. Washington, DC: National Academies Press, 1998. Available at: https://www.ncbi.nlm.nih.gov/books/NBK114310.

The authors declare that there are no conflicts of interest present.